熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑
| 型 號： | 熒光免疫層析法 |
| 報 價： |  |
熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑，2002年8月2日,美國南部路易斯安那政府宣布全州進入緊急狀態(tài),控制正在該州迅速擴散的“西尼羅河病毒“。
- 產(chǎn)品描述
熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑
廣州健侖生物科技有限公司
檢查
1.實驗室檢查
白細胞數(shù)減少，腦炎型者腦脊液中淋巴細胞增多，蛋白增高。
2.免疫學檢查
利用血清學抗體檢測方法，常用ELISA（酶聯(lián)免疫吸附實驗）法，采用患者急性期和恢復(fù)期雙份血清，兩份血清同時進行檢測，以恢復(fù)期血清較急性期特異性IgG抗體滴度升高4倍以上為陽性，有助于本病的診斷。
3.病原學檢查
自潛伏末期至發(fā)病后第5天，從患者血液或腦脊液中分離出病毒，陽性率較高，對新分離病毒的鑒定一般采用已知血清進行中和實驗。
4.分子生物學檢查
RT-PCR（逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng)）法檢測，通過設(shè)計西尼羅河熱病毒特異引物對血清或腦脊液標本進行RT-PCR試驗，陽性率高，具有特異性診斷價值。
用途
西尼羅(WN)病毒IgG ELISA，利用了西尼羅重組抗原檢測人體血清或血漿中的西尼羅抗體。本實驗僅用于輔助診斷人感染了西尼羅病毒，不用于篩查血液或血液成分。僅供專業(yè)人員體外診斷使用。
概述
感染了西尼羅病毒會導致包括腦炎等一系列癥狀的疾病，西尼羅病毒在世界廣泛傳播，已在50多個國家檢測出該病毒。本試驗經(jīng)CDC提供的試劑檢驗與驗證。本試驗使用了一種稱為WNRA的重組抗原，它可以作為西尼羅病毒感染的快速血清學指標，WNRA蛋白是一種重組抗原，它是由含有西尼羅病毒兩個抗原的序列多肽構(gòu)成。
實驗的原理
檢測西尼羅病毒IgG ELISA 是基于兩步夾心法原理制造的。
提供的材料
- 微孔板（96孔 12x8）：即用 每孔均包被結(jié)合西尼羅重組抗原的單抗。2－8℃下保存至保質(zhì)期。
注意：WNRA和NCA已包被于微孔板。
- IgG樣品稀釋液：1支 25ml 即用 2-8℃下保存至使用。
- IgG陰性質(zhì)控：1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
- IgG陽性質(zhì)控：1支 30ul 2-8℃下保存至使用。要長時間儲存，將其分裝于小瓶里，在-70℃下儲存。
- 洗滌液（10X）：1瓶 120ml 2－8℃下保存至使用。
- EnWash：1瓶 20ml 2－8℃下保存至使用。
- 酶聯(lián)物：一瓶6ml 即用 2－8℃下保存至使用。
- TMB底物液： 1支 9ml 即用 2－8℃下保存至使用。
- 終止液；1支6ml 即用 2－8℃下保存至使用。
試劑應(yīng)避免反復(fù)凍融。
西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒
西尼羅河病毒熒光玻片法檢測試劑盒
西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒
西尼羅河間接免疫熒光法檢測試劑盒
熱帶病西尼羅河抗原檢測試劑
操作步驟：
- 標記將要使用的板條，注意微孔板已經(jīng)按照統(tǒng)一排列，如下所述包被西尼羅抗原和質(zhì)控抗原。
西尼羅抗原 |
| |
板條＃1 | 板條＃2 | |
A | WNRA | WNRA |
B | WNRA | WNRA |
C | WNRA | WNRA |
D | WNRA | WNRA |
E | NCA | NCA |
F | NCA | NCA |
G | NCA | NCA |
H | NCA | NCA |
- 將血清樣品﹑陰性質(zhì)控和陽性質(zhì)控同樣地用樣每孔加入50ul稀釋后的樣品，以下為一個血清樣品使用一個板條的*。
- 品稀釋液按1：300稀釋。
| 板條1 | 板條2 | |
血清樣品 | |||
A | IgG N | 樣品1 | |
B | IgG N | 樣品1 | |
C | IgG P | 樣品2 | |
D | IgG P | 樣品2 | |
E | IgG P | 樣品2 | |
F | IgG P | 樣品2 | |
G | IgG N | 樣品1 | |
H | IgG N | 樣品1 | |
- 封板，在濕潤的溫育器里37℃下溫育1小時。
- 溫育后，用自動洗板機，使用洗滌液洗板6次。
- 在每孔中加入50ul的酶聯(lián)物。
- 封板，在濕潤的溫育器里37℃下溫育1小時。
- 溫育后，用自動洗板機，使用洗滌液洗板6次。
- 每孔加入150ul的EnWash，在室溫下溫育5分鐘
- 溫育后，用自動洗板機，使用洗滌液洗板6次。
- 每孔加入75ul的TMB底物液。
- 封板，在室溫下，避光處溫育10分鐘。
- 每孔加入50ul的終止液終止反應(yīng)。
- 在450nm處讀取吸光率。
結(jié)果的計算
結(jié)果的變化將會非常大，以下結(jié)果僅供指引。
計算ISR值：
計算在同一實驗里WNR抗原的兩個陰性質(zhì)控的平均值，計算同一實驗里NC抗原的兩個陰性質(zhì)控的平均值，用WNRA/NCA，得出陰性質(zhì)控的ISR值。同樣地計算陽性質(zhì)控和樣品得ISR值，陽性質(zhì)控的ISR值應(yīng)高于3.0，陰性質(zhì)控的ISR值應(yīng)低于1.5。
結(jié)果的判斷：
ISR | 結(jié)果 | 解釋 |
≤2.0 | 陰性 | 沒有檢測到IgG抗體 |
2.0－3.0 | 可疑 | 需確證實驗 |
≥3.0 | 陽性 | 存在IgG抗體，建議做確定性實驗 |
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肺炎鏈球菌6、14、19及23型，常引起兒童 肺炎鏈球菌性疾病。40%～70%的正常人上呼吸道中攜帶有 毒力的肺炎鏈球菌。由此可見呼吸道粘膜對肺炎鏈球菌存 在很強的自然抵抗力。當出現(xiàn)某種降低這種抵抗功能的因 素時，肺炎鏈球菌可引起感染，如①呼吸道功能異常：病 毒及其它感染性因子損傷呼吸道粘膜上皮細胞；某些異常 因素（如過敏）導致粘液的過度分泌，使侵入的病原菌受 到保護；各種原因?qū)е碌闹夤茏枞案鞣N原因?qū)е碌睦w 毛功能損傷；②酒精及藥物中毒：酒精及某些藥物中毒可 抑制吞噬細胞的活性及咳嗽反射，有利于病原菌的吸入； ③循環(huán)系統(tǒng)功能異常及任何原因?qū)е碌姆纬溲⑿墓δ芩? 竭；④其它：營養(yǎng)缺陷、體質(zhì)虛弱、貧血、血清補體水平 低下等。肺炎鏈球菌肺炎常突然發(fā)病，表現(xiàn)為高熱、寒戰(zhàn) 、胸膜劇烈疼痛、咳鐵銹色痰。10%～20%的患者可于高熱 期伴發(fā)菌血癥。其病理表現(xiàn)主要是zui初肺泡內(nèi)有大量纖維 蛋白滲出液，繼之是紅細胞和白細胞向肺泡內(nèi)滲出，zui終 導致病變部位肺組織實變。病變通常僅累及單個肺葉，故 稱為大葉性肺炎。如果早期使用抗生素治療，可阻止肺實 變發(fā)生。
