豬偽狂犬病毒IgG抗體檢測試劑盒使用說明書

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   偽狂犬病是由偽狂犬病毒（PRV）引起的豬和多種動物共患的一種急性傳染病。豬偽狂犬病主要引起仔豬的高死亡率和妊娠母豬的繁殖障礙，流行廣泛，一旦傳入豬群，將導致巨大經濟損失，且很難*。
在豬的預防免疫工作中,zui值得關注的就是強化免疫的接種時機問題。在過高的抗體水平進行免疫,過高的抗體水平還會中和疫苗,影響疫苗的免疫效果,導致免疫失??；在較低的抗體水平進行免疫,又會出現抗體保護真空期,威脅豬的健康。該試劑盒檢測反映抗體水平，利于指導免疫時機。
【使用意義】
接種豬偽狂犬疫苗后，并不能保證產生保護性抗體。由于多種因素可能導致豬不產生或產生低水平豬偽狂犬病毒抗體。通過使用本試劑，對免疫豬偽狂犬疫苗抗體動態(tài)水平進行監(jiān)測，能快速準確的評價免疫程序，驗證免疫效果；結合免疫后抗體變化特征，能快速選擇*的第二次免疫時間，有效的制定和實施免疫計劃。
【使用時間】
①豬偽狂犬病毒疫苗免疫后免疫效果監(jiān)測
②平時的抗體監(jiān)測
【檢測原理】
包被經純化的豬偽狂犬病毒，抗豬IgG抗體作為酶標記抗體，利用間接法來檢測被檢材料中是否含有豬偽狂犬病毒抗體。
【產品內容】
1.豬偽狂犬病毒抗原包被微孔板條：96Tx2
2.酶標記物：22ml×1
3.樣品稀釋液：20ml×1
4.顯色劑A：12 ml×1
5.顯色劑B：12 ml×1
6.洗滌液（用前1：25稀釋）：25 ml×1
7.豬偽狂犬病毒抗體陽性對照血清：1.5 ml×1
8.豬偽狂犬病毒抗體陰性對照血清：1.5 ml×1
9.終止液：12 ml×1
10.封口膜：6張
11.密封袋：1個
12.說明書：1份
【操作步驟】
1.使用前將試劑盒置室溫30分鐘，恢復至室溫。
2.取所需用量包被微孔板條，設空白、陰性及陽性對照各2孔，未用的板條盡快密封，2～8℃保存。
3.陰性、陽性對照孔分別加陰性、陽性對照血清100μl；樣品孔每孔先加樣品稀釋液90μl，再加樣品10ul（或樣本1：10稀釋后加100μl）；空白對照孔不加。
4.混勻，置37℃溫浴30分鐘。
5.扣去孔內液體，每孔加滿洗滌液，靜置60秒后棄去，重復洗滌5次，拍干。
6.每孔加酶標記物100μl（空白孔除外）。
7.置37℃溫浴30分鐘。
8.洗滌，同步驟5。
9.每孔依次加顯色劑A、顯色劑B各50μl，混勻，37℃避光反應10分鐘。
10.每孔加終止液50μl，混勻，置酶標儀450nm處測各孔A值（建議用雙波長450nm、630nm）。
【結果判定】
1.陰性對照：正常情況下，陰性對照孔A值≤0.1；
2.陽性對照：正常情況下，陽性對照孔A值≥0.4；
3.臨界值（C.O.）的計算：臨界值=0.15+陰性對照孔均值；所有陰性、陽性對照和樣品的A值均須減去空白平均值后作為計算值；陰性對照孔A值大于0.10時應舍棄，如所有陰性對照孔A值都大于0.10時須重復實驗；陰性對照孔低于0.05時以0.05計算。
4.結果判定：
檢測標本A450值≥臨界值判定為本試驗陽性；檢測標本A450值＜臨界值判定為本試驗陰性。
【注意事項】
1.操作時必須戴手套，穿工作衣，嚴格健全和執(zhí)行消毒隔離制度。
2.試驗結果的判定必須以酶標儀讀數為準。
3.樣品稀釋液應用加液器加注，并經常校對其準確性。
4.洗滌時各孔均需加滿液體，防止孔口有游離酶不能洗凈。
5.所有樣品洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
6.微孔板從冷藏環(huán)境中取出時應在室溫中平衡至潮氣干盡后方可，未用完的微孔板須放入有干燥劑的密封袋中保存。
7.用于檢測的樣品應保持新鮮。
8.剩余樣品及廢棄物應經121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘，或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
9.不同批號試劑組分不得混用。
【保存與有效期】
于2～8℃避光保存，有效期自成品檢定合格之日起為12個月。【生產企業(yè)】 廣州健侖生物科技有限公司

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